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2023-03-24 19:58栏目:香港试管价格表
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病原性葡萄球菌能产生血浆凝固酶,使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附于细菌表面,生成凝块,因而具有抗吞噬的作用。凝固酶试验对于判定该菌株是否具有致病力,很有帮助。葡萄球菌凝固酶试验被广泛地用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌。

葡萄球菌所产生的凝固酶有以下两种:

结合凝固酶(即凝聚因子):是一种结合于菌体细胞壁的酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使之变成纤维蛋白,而使葡萄球菌凝集成块,玻片法阳性结果是由此酶(凝聚因子)所致。

游离凝固酶:是凝血酶原样物质,不直接作用于血浆纤维蛋白原上,而被血浆中的致活剂(即凝固酶致活因子)激活后,变成耐热的凝血酶样物质,此物质可使血浆中的液态纤维蛋白原变为固态纤维蛋白,从而使血浆凝固。试管法的阳性结果为此酶所致。

血浆凝固酶试验方法

玻片法:

在1张洁净玻片中央加1滴9g/L氯化钠(生理盐水)溶液,用接种环取待检培养物与其混合(设阳性和阴性对照) 制成菌悬液,若经10~20s 内无自凝现象发生,则加入兔新鲜血浆1环,与菌悬液混合,观察结果。5~10s内出现凝集者为阳性。

试管法:

用生理盐水将新鲜兔血浆4倍稀释,取0.5 ml于试管再加0.5ml待测菌浓菌悬液(需做阳性对照及阴性对照。),混匀后置37℃水浴中,每30min观察1次结果。若3小时内试验管和阳性对照管出现凝固,阴性对照管(即浓菌液管)不凝固,为阳性;若阴性,继续观察到24小时,不凝固者为阴性。如有凝块或整管凝集出现为阳性。4h后无上述现象出现,则放置过夜后再观察。

(商品化)冻干血浆法:

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每支西林瓶加入0.5mL灭菌生理盐水至完全溶解,然后加入葡萄球菌24h肉汤培养物0.3mL,充分混匀, 盖好西林瓶胶塞,置于36±1℃培养,在6h内定时观察结果。结果观察(如下图所示):倾斜或倒置试管时,呈现凝固块,或凝固块体积大于原体积的一半时,为血浆凝固酶阳性。观察结果时应避免用力振动西林瓶,以免凝块振碎。

血凝固酶实验

血浆凝固酶试验应用:

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本试验仅用于致病性葡萄球菌的鉴定。

血浆凝固酶试验注意事项

玻片法:

10 秒内观察结果,如超过10 秒可出现假阳性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。 可选择的玻片凝集试验法还包括检测凝集因子和蛋白A的胶乳凝集试验。但胶乳凝集试验和玻片凝固酶试验的结果并不完全一致。

尽管胶乳凝集试验鉴定路邓葡萄球菌(Staphylococcus lugdunensis)的可靠性较差,但鉴定金黄色葡萄球菌的特异性和灵敏性均高于传统的玻片凝固酶试验。有些腐生葡萄球菌和松鼠葡萄球菌及某些微球菌属的菌种可能胶乳凝集试验阳性,但玻片凝固酶试验通常阴性。

a. 试管法葡萄球菌凝固酶试验阳性者,应见到明显的纤维蛋白凝胶块,出现羊毛状或纤维状沉淀物并非真正凝固,应判为阴性。中间型葡萄球菌、猪葡萄球菌需要较长时间(4H以上)孵育,才可出现阳性。

b. 如果培养时间超过4H,应考虑以下几点:

Ⅰ.延长培养时间后,有些菌株产生的葡萄球菌激酶(溶纤维蛋白酶),可以裂解凝块,产生假阴性结果;

Ⅱ.如果使用的血浆不是无菌的(或部分不是无菌的),假阳性和假阴性结果均有可能发生;

Ⅲ.所用待测菌不纯,延长培养时间后,污染菌可能导致假阳性结果。在这点上,含EDTA的血浆优于柠檬酸盐血浆,因为利用柠檬酸盐的细菌(如一些链球菌)可能通过消耗柠檬酸盐促进凝集发生。

Ⅳ.所用血浆缺乏纤维蛋白原(脱纤维血浆)。

试管法:

须制备浓厚的均匀菌悬液,以便观察结果。

最好用EDTA 抗凝的兔血浆,不主张用人的抗凝血,除非经过试验证实其中不含感染因子、没有凝血能力和没有抑制因子。不同种动物血浆因子不同,凝固状态也不同,兔血浆凝块结实,凝固速度快,优于人血浆。

做试管的方案选择

试验不可在高盐培养基上的取菌落,因为可能出现自凝或假阳性。

若被检菌为陈旧的肉汤培养物(超过18~24H),或生长不良,凝固酶活性低的菌株可能检测不出来。

为防止玻片法检测的假阳性反应,必须严格按《全国临床检验操作规程》进行操作。当怀疑待测菌是金黄色葡萄球菌时,对玻片凝固酶阴性的结果应做试管法凝固酶试验确证。玻片法和试管法凝固酶试验的血浆标准是:必须含有足够浓度的凝固酶反应因子和纤维蛋白原,必须无溶纤维蛋白活性和无抑制剂。

本试验应同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性的葡萄球菌的肉汤培养物作为对照。

商品化冻干血浆试剂需按照厂家提供的产品说明书使用及结果判读。

试管胚胎盲移时医生也都是需要通过显微镜查看移植管内是否有胚胎残留,若是没有那就可以确定胚胎已经放进子宫了。不管是盲移还是在腹部B超引导下移植,医生都是将移植管置入到子宫腔内,而后将胚胎注射到子宫腔内,由于肉眼或B超都不能看到胚胎,仅观察得到移植管的活动轨迹,以及移植管尖端的位置。所以移植结束后,还要在显微镜下再检查一下移植管内是否有胚胎残留,如果移植管内没有胚胎存在,则基本可以确定胚胎已经放入子宫腔里了。

到了试管胚胎移植这一步,也就意味着试管周期要结束了,大家要成功了,但移植这一步也是很重要的,术前、术中、术后都有需要注意的事项,这里就为大家介绍一下移植流程以及一些注意事项:

1.术前一小时左右开始少量多次的饮水500ml,使得膀胱充盈,有利于移植术的顺利进行;

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2.进入移植室,会进行信息核对后,记得带上身份证和结婚证那些证件,然后就会进行准备工作,医护人员会引导患者上手术床行术前准备,首先外阴清洁,同时借助影像学,在腹部B超下确认位置;

3.做好准备工作后移植手术就正式开始了,移植医生再次进行术前清洁,用棉签擦拭宫颈粘液,然后会小心翼翼地将承载着胚胎的移植导管送进宫颈管、子宫腔,根据B超指示,找到内膜最肥沃的位置,使胚胎温柔地从导管内滑入宫腔,有的经验丰富的医生也可能会盲移,这也不用担心,后护士会通过B超显示屏指引患者查看宝宝的“着落”点,移植就这样顺利圆满完成;

4.移植手术结束后,建议卧床休息30分钟,当然,如感觉尿急可先排空小便,以免膀胱充盈过度“挤压”子宫,影响宝宝“休息”。

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